%0 Journal Article %T Expression detection of med-ORF12 encoding a stereochemical ketoreductase possibly involved in medermycin biosynthesis
美达霉素产生菌中立体专一性酮基还原酶基因med-ORF12的表达 %A Rui Sun %A Ming Liu %A Caixia Gong %A Wei Wang %A Aibing Zeng %A Aiying Li %A
孙锐 %A 刘明 %A 宫彩霞 %A 王蔚 %A 曾爱兵 %A 李爱英 %J 微生物学报 %D 2012 %I %X 摘要:美达霉素是链霉菌产生的具有强抗肿瘤活性的芳香聚酮类抗生素,其砒喃环并内酯结构对于其抗癌活性非常重要。位于美达霉素生物合成基因簇中的基因med-ORF12 编码立体专一性酮基还原酶,可能参与美达霉素的砒喃环并内酯结构中手性中心(C3S)的形成,但在美达霉素产生菌中的功能和表达还未曾研究。【目的和方法】为了研究med-ORF12 在野生菌中的表达情况以及与美达霉素生物合成的关系,本文采用了原核表达、抗体制备、免疫杂交等技术方法对这个基因展开了体内表达研究。【结果】首先利用pET 载体建立了med-ORF12 的原核表达系统,在优化诱导表达条件的基础上获得了可溶性目的蛋白,制备了相应的多抗血清;然后利用多抗血清对美达霉素产生菌中的基因med-ORF12 的表达情况进行了检测,表明在美达霉素产生菌中参与次生代谢的med-ORF12 在稳定期大量表达,同时伴随美达霉素的大量积累。【结论】这些结果表明在美达霉素产生菌中,基因med-ORF12 参与次生代谢,其表达与美达霉素生物合成有一定相关性。 %K 关键词: %K 链霉菌,次生代谢,美达霉素,立体专一性酮基还原酶 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=3B2CD3BB807ED8FAEB55E42BF429671A&yid=99E9153A83D4CB11&vid=286FB2D22CF8D013&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=BFE7933E5EEA150D&eid=68D88C2FCF9C3098&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0