%0 Journal Article
%T Cloning and expression of Micrococcus luteus IAM 14879 Rpf and its role in the recovery of the VBNC state in Rhodococcus sp.DS471<br>藤黄微球菌Rpf活性蛋白的制取及其对红球菌VBNC菌体的复苏作用
%A Linxian Ding
%A Pinghua Zhang
%A Huachang Hong
%A Hongjun Lin
%A Akira Yokota
%A <br>丁林贤
%A 张萍华
%A 洪华嫦
%A 林红军
%A 横田明
%J 微生物学报
%D 2012
%I 
%X 摘要:【目的】克隆藤黄微球菌Micrococcus luteus IAM 14879 (=NCIMB 13267)的复苏促进因子Rpf(resuscitation promoting factor) 的基因，在大肠杆菌中表达获取基因重组蛋白，考察对近缘高GC 革兰氏阳性菌红球菌Rhodococcus sp.DS471 活的非可培养VBNC (viable but non-culturable)菌体的复苏促进生长能力。【方法】抽提制备藤黄微球菌的DNA，确定rpf 基因引物进行PCR 扩增，利用pET15b 质粒载体并转化大肠杆菌DE3 表达，以SDS-PAGE 检验获取纯化重组蛋白;在培养基中添加Rpf，以MPN (most probable number) 法计数、评价对VBNC 状态菌体的复苏促进生长效果。【结果】基因测序证实获得藤黄微球菌的rpf 基因并在大肠杆菌中表达;SDS-PAGE 分析表明获得rpf 基因的重组蛋白;该蛋白对处于VBNC 状态的红球菌具有近100倍的复苏促进生长能力。【结论】成功克隆了藤黄微球菌的rpf 基因，在大肠杆菌中获得了表达，表明了Rpf 蛋白对处于VBNC 状态的红球菌具有复苏促进生长效果。
%K 关键词:
%K 藤黄微球菌，Rpf，克隆与表达，VBNC，红球菌
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=B5A688D5BB062443B7B170CBB6EA0B15&yid=99E9153A83D4CB11&vid=286FB2D22CF8D013&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=E44E40A2398D4F2A&eid=0D0D661F0B316AD5&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0