%0 Journal Article
%T Inhibition of porcine circovirus type 2 replication by the plasmid vector ex-pressing siRNAs
载体表达的siRNA分子对猪圆环病毒2型复制的抑制作用
%A Haiyan Wang
%A Wenbo Liu
%A Song Gao
%A Xiufan Liu
%A
王海燕
%A 刘文博
%A 高崧
%A 刘秀梵
%J 微生物学报
%D 2008
%I
%X 目的]寻找一种基于RNA干扰技术的猪圆环病毒2型感染的防控方法.方法]根据猪圆环病毒2型毒株基因组核苷酸序列,设计了3条特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)分子,其中2条针对猪圆环病毒1型和2型复制酶基因(rep),1条针对猪圆环病毒2型核衣壳蛋白基因(cap),将合成的DNA片段退火形成双链,分别连接到RNAi-Ready pSIREN-RetroQ ZsGreen载体鼠源U6启动子下游,转化大肠杆菌得到阳性克隆,测序鉴定后分别命名为Retro-SH1,Retro-SH4,Retro-SH6.用上述质粒转染PCV2感染前、后的Dulac细胞及肌肉注射PCV2感染前、后的BALB/c小鼠,应用实时定量PCR试验评价其对病毒在细胞及小鼠体内复制的抑制作用,免疫组化法检测脾脏中病毒的存在.结果]感染PCV2前或后转染500 ng Retro-SH1,Retro-SH4,Retro-SH6质粒能有效抑制PCV2在Dulac细胞上的复制,抑制率最高可达99%以上,对10株不同来源的临床分离株在细胞中复制的抑制作用同样明显,且不同毒株间差异不大.动物试验中,肌肉注射10μg上述不同siRNA分子对小鼠体内PCV2的复制有一定的抑制作用,其抑制率在26%至99%之间.结论]载体表达的siRNA分子可能成为防控猪圆环病毒2型感染的一种新工具.
%K Keywords: RNA interference
%K porcine circovirus type 2
%K replication
%K inhibition
RNA干扰
%K 猪圆环病毒2型
%K 复制
%K 抑制
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=DA7C68941984B9699DAF6A94A1738479&yid=67289AFF6305E306&vid=B6DA1AC076E37400&iid=708DD6B15D2464E8&sid=5D9E227628843A85&eid=F3699C8B183A53ED&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=1&reference_num=13