%0 Journal Article
%T Producing Recombinant Adenovirus Encoding Green Fluorescent Protein (Ad-GFP) by Suspension Cultured HEK-293 N3S Cells<br>悬浮培养HEK-293 N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的实验研究
%A TIAN Bo
%A WU Bin
%A ZHANG Qun-Wei
%A BI Jian-Jin
%A WANG Lan
%A ZHU Bao-Zhen
%A GENG Yue
%A WU Zu-Ze
%A <br>田博
%A 吴彬
%A 张群伟
%A 毕建进
%A 王澜
%A 朱宝珍
%A 耿越
%A 吴祖泽
%J 微生物学报
%D 2007
%I 
%X 利用5L生物反应器悬浮培养HEK-293 N3S细胞生产携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(recombinant adenovirus-green fluorescent protein，Ad-GFP)，为规模化生产腺病毒基因药物建立一种稳定可行的生产工艺。复苏的种子细胞进行逐级放大最后接入5L搅拌式生物反应器中，采用含5％胎牛血清（FBS）的DMEM/F12培基灌流培养293 N3S细胞，当细胞密度达到(2～4)×106个/mL时感染Ad-GFP，48h后收获细胞，经两步氯化铯超速离心获得纯化的Ad-GFP。采用紫外分光光度计比色法和高压液相色谱法（HPLC）测定病毒颗粒数和纯度，采用组织培养半数感染剂量（TCID50）法检测腺病毒的感染滴度。连续培养10～12d，细胞密度可达到(2～4)×1066个/mL左右，纯化的Ad-GFP感染滴度和颗粒数分别为1.0×1011IU/mL和1.68×1012VP/mL，比活性为6.0%，A260A280比值为1.33，产品纯度达到99.2%。建立了5L生物反应器悬浮培养293 N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的生产工艺，对携带其他基因的重组腺病毒药物生产具有一定的指导意义。
%K suspension culture
%K recombinant adenovirus
%K HEK-293 N3S cells
%K bioreactor<br>悬浮培养，重组腺病毒，HEK-293
%K N3S细胞，生物反应器
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=001C07FE05142DB0245A828E01536FA7&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=94C357A881DFC066&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0