%0 Journal Article
%T Quantitative detection of NADH by in vitro bacterial luciferase bioluminescent<br>细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测
%A Cexia Mei
%A Jingxue Wang
%A Hong Lin
%A Jing Wang
%A <br>梅册霞
%A 王静雪
%A 林洪
%A 王晶
%J 微生物学报
%D 2009
%I 
%X 摘要：【目的】本研究旨在建立鳆发光杆菌（Photobacterium leiognathi）YL 荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系，并对荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系应用于NADH的定量检测进行初步探索。【方法】利用从鳆发光杆菌提取并经部分纯化的荧光素酶和FMN-NADH氧化还原酶，通过优化体系中各底物的添加量，实现荧光素酶的体外发光。【结果】荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系为：1 mL酶液中添加100 μL十二烷醛（27 mmol/L）、0.5 μL FMN-Na（10 mmol/L）、300 μL NADH（0.14 mmol/L）。NADH与荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体系的发光强度呈良好的线性关系，其线性范围为1.0×10-10 ～1.0×10-8 mol/L。【结论】荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系可以简便、灵敏、快速的定量检测NADH，为其进一步应用于环境检测、食品卫生与安全等领域活细菌数量的检测奠定了基础。
%K Keywords: Photobacterium leiognathi
%K Bacterial luciferase
%K FMN-NADH oxidoreductase
%K NADH
%K Detection<br>关键词：鳆发光杆菌
%K 荧光素酶
%K FMN-NADH氧化还原酶
%K NADH
%K 检测
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=3C792E38E97A52C30677E8C9E1E46D45&yid=DE12191FBD62783C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=7C786AA9670CF26C&eid=323ACE6C9CE37BAB&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=18