%0 Journal Article
%T Expression of Endopolygalacturonase A of Aspergillus oryzae in Escherichia coli<br>米曲霉（Aspergillus oryzae）果胶酸内切水解酶（PGA）在原核系统中重组表达
%A ZHANG Yu-Ling
%A ZHAO Qing-Xin
%A ZHU Hong
%A SUN Jing
%A HAN Feng-Min
%A YUAN Sheng
%A <br>张宇玲
%A 赵庆新
%A 朱泓
%A 孙静
%A 韩丰敏
%A 袁生
%J 微生物学报
%D 2007
%I 
%X 果胶酶具有广阔的商业用途，在食品工业上主要用于果汁和酒类的澄清、提高植物油的提取率、提高水果的硬度和植物纤维脱胶。米曲霉（Aspergillus oryzae）一直用于传统发酵食品的生产，自然条件下其果胶酶的产量较低。文献报道的果胶酶的重组表达成功的例子较少，且活性较低。通过RT-PCR 的方法，获得不含信号肽的果胶酸内切水解酶A(polygalacturonase A, PGA) 的cDNA，PGA cDNA 连入pET-28a (+)载体, 构建 pET-28a (+)-pga 质粒。pET-28a (+)-pga 转化Turner (DE3) placⅠ细胞，得到转化子pET-28a (+)-pga-Turner (DE3) placⅠ，首次实现了米曲霉PGA在大肠杆菌系统中过表达，进一步对PGA在大肠杆菌系统中表达的条件进行了研究。在37℃、220 r/min条件培养pET-28a (+)-pga-Turner (DE3) placⅠ细胞，OD600至 0.8左右时，用500μmol/L isopropyl β-D-thiogalactogalactopyranoside (IPTG)进行诱导表达，在15℃和170r/min条件下继续培养24 h，表达效果最好，相对于每毫升培养基而言，产酶可达到70u/mL，是米曲霉自然条件产酶量的87.5倍，远优于文献报道的重组表达的PGA酶活
%K Aspergillus oryzae
%K polygalacturonase
%K Escherichia coli
%K expression<br>米曲霉
%K 果胶酸水解酶
%K 大肠杆菌
%K 原核表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=2C44547D32B8B3F15D6FE3D34D2C0EEF&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0