%0 Journal Article
%T Construction of Adenoviral Vector Encoding Soluble Human sTNFRI-IgGFc cDNA and Its Expression in Human Airway Smooth Muscle Cells (HASMCs)<br>Ad-sTNFRI-IgGFc腺病毒载体的构建及其转染人气道平滑肌细胞
%A Jin Su
%A Changxuan You
%A Shaoxi Cai
%A Li M
%A Xiaoning Wang
%A Qian Wen
%A Wei Luo
%A Yongta Huang
%A <br>苏瑾
%A 尤长宣
%A 蔡绍曦
%A 马骊
%A 王小宁
%A 温茜
%A 罗微
%A 黄泳塔
%J 微生物学报
%D 2008
%I 
%X TNF-a是一种具有广泛生物学活性的前炎症细胞因子, 参与哮喘整个病理生理过程。可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)可以拮抗肿瘤坏死因子活性, 已被用来治疗与TNF相关的炎性疾病。将sTNFRI-IgGFc基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316, 与辅助质粒pBHGloxΔE1, 3Cre共转染HEK293细胞, 重组产生Ad-sTNFRI-IgGFc, PCR鉴定毒种正确后, 进行扩增、纯化和滴度测定, 转染人气道平滑肌细胞, 利用RT-PCR、免疫组化方法, 流式细胞仪, ELISA检测转染后细胞中sTNFRI-IgGFc的转录和表达。实验结果证明成功构建了Ad-sTNFRI-IgGFc腺病毒载体, 感染性滴度达3×1010 TCID50/mL, 200 moi转染气道平滑肌细胞阳性率达99.32%, 转染后气道平滑肌细胞在mRNA和蛋白水平均有sTNFRI-IgGFc表达。转染上清稀释64倍后仍对TNF有拮抗活性。为将表达sTNFRI-IgGFc腺病毒基因治疗哮喘的实验研究提供了基础。
%K soluble tumor necrosis factor alpha receptor(sTNFR)
%K adenovirus vector
%K human airway smooth muscle cells(HASMCs)
%K asthma<br>可溶性肿瘤坏死因子受体
%K 腺病毒载体
%K 人气道平滑肌细胞
%K 支气管哮喘
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=8CA53F0AC4DCD933AB4D65F7E3412DFE&yid=67289AFF6305E306&vid=B91E8C6D6FE990DB&iid=94C357A881DFC066&sid=786A9BAE5CF9B9EE&eid=EEAFC972BAD75B1F&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0