%0 Journal Article
%T Construction of Astragalus sinicus AD-cDNA library and identification of proteins interact with the leghemoglobin<br>紫云英AD-cDNA文库构建及与豆血红蛋白Lb相互作用靶蛋白的筛选
%A Yan Liu
%A Huilin Gu
%A Xiaobo Xiong
%A Yixing Li
%A Youguo Li
%A <br>刘燕
%A 谷慧琳
%A 熊小波
%A 李一星
%A 李友国
%J 微生物学报
%D 2010
%I 
%X 摘要：【目的】本文旨在构建紫云英酵母双杂交AD-cDNA文库和互作靶蛋白筛选平台，为深入研究共生固氮作用的分子机理奠定工作基础。【方法】以接种华癸中慢生根瘤菌7653R的豆科植物紫云英不同时期根部组织为材料，抽提和纯化RNA，构建了一个酵母AD-cDNA文库。库容量达到1.02×106/3 μg pGADT7-Rec DNA，插入片段大小1-1.5 kb左右。以紫云英豆血红蛋白基因AsB2510构建诱饵载体pGBKT7-AsB2510，利用酵母双杂交技术，筛选与诱饵蛋白相互作用的靶蛋白。【结果】在含有X-gal的SD四缺培养基上筛选得到26个克隆，经过质粒抽提、PCR鉴定、回转酵母验证获得10个阳性克隆。【结论】对阳性克隆的外源片段进行了测序和同源性分析，发现一个值得深入研究的含有tify domain和Divergent CCT motif的转录调控因子。
%K Keywords: Astragalus sinicus
%K Mesorhizobium huakuii 7653R
%K AD-cDNA library
%K AsB2510
%K yeast two-hybird
%K interacting protein<br>关键词：紫云英
%K 华癸中慢生根瘤菌7653R
%K AD-cDNA文库
%K 酵母双杂交
%K AsB2510
%K 互作蛋白
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=D9459346EE35FF6A3DB1F527060C1136&yid=140ECF96957D60B2&vid=771152D1ADC1C0EB&iid=59906B3B2830C2C5&sid=BF7851EF606736C9&eid=2E3D2E3C7A6F11A2&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0