%0 Journal Article
%T Cloning and expression of ORF146 gene of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus II (SpltMNPVII)<br>斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF146基因的克隆、表达与启动子活性分析
%A Ye Sheng
%A Dan Min
%A Yinü Li
%A Zhifang Zhang
%A Yuexiong Zhu
%A Jiang Zhu
%A <br>盛晔
%A 闵丹
%A 李轶女
%A 张志芳
%A 朱越雄
%A 朱江
%J 微生物学报
%D 2010
%I 
%X 摘要: 【目的】研究斜纹夜蛾核型多角体病毒II ORF146基因的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV II ORF146基因序列设计引物，经PCR扩增克隆ORF146基因。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF146片段的原核表达载体，表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明，读码框含1383 bp，编码460个氨基酸的蛋白质，推定分子量为50.4 kD。启动子活性分析和转录时相分析都表明该基因是个早、晚期都表达的基因，在病毒感染8h和18h有两个转录峰，24h以后转录水平略有下降，但趋于稳定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高，效价可达1:3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF146基因是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。推测ORF146基因可能与SpltMNPV II病毒感染宿主细胞后病毒DNA复制有关。制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。
%K Key words: Virus
%K Spodoptera litura
%K nucleopolyhedrovirus
%K ORF146 gene
%K expression
%K polyclonal antibody<br>关键词:
%K 斜纹夜蛾
%K 核型多角体病毒
%K ORF146基因
%K 原核表达
%K 多克隆抗体
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=B72B7E8283C64F9628BE889CF4FC769E&yid=140ECF96957D60B2&vid=771152D1ADC1C0EB&iid=59906B3B2830C2C5&sid=22E618DED444E3B5&eid=C20D616EFC5754AE&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0