%0 Journal Article
%T Purification of L-sorbose/L-sorbosne Dehydrogenase from Ketogulonigenium vulgare and Construction and Selection of Genomic Library<br>醇醛脱氢酶的分离纯化及其基因文库的构建和筛选
%A XIE Li
%A ZHANG Duo
%A DOU Yan-Feng
%A ZHANG Li-Ping
%A ZHAO Bao-Hua
%A <br>谢莉
%A 张铎
%A 窦燕峰
%A 张丽萍
%A 赵宝华
%J 微生物学报
%D 2007
%I 
%X 在维生素C的发酵生产过程中，普通生酮基古龙酸菌S2（Ketogulonigenium vulgare)能产生醇醛脱氢酶，将L-山梨糖转化为VC的前体2-酮基-L-古龙酸（2-KLG）。通过超声波破碎菌体、硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析，Q Sepharose High Performance柱层析等过程，从普通生酮基古龙酸菌S2发酵液中分离纯化了醇醛脱氢酶，并用该纯化酶免疫新西兰兔制备出了合格抗血清。同时，普通生酮基古龙酸菌S2基因组DNA经Sau3AⅠ部分酶切后，与黏粒载体pKC505连接，用包装蛋白进行包装，转染大肠杆菌DH5ɑ，构建了基因组文库。最后应用免疫酶斑点技术（Dot-ELISA）从12 000个克隆子中筛选得到一个阳性克隆K719#。通过检测该基因工程菌的活性，表明K719#具有使L-山梨糖转化为2-KLG的功能，从而使醇醛脱氢酶在大肠杆菌中获得了高效表达，这为简化VC的生产工艺奠定了基础。
%K Ketogulonigenium
%K L-sorbose/L-sorbosne
%K dehydrogenase
%K purification
%K Dot-ELISA
%K gene library and selection<br>普通生酮基古龙酸菌
%K 醇醛脱氢酶，分离纯化，免疫酶斑点技术，文库筛选
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=0A2304BC35BDD045551CC2F1A6A6F52B&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=94C357A881DFC066&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0