%0 Journal Article
%T Sinorhizobium morelensS-5中N_氨甲酰基水解酶基因的克隆、表达和纯化
%A 吴胜
%A 王建军
%A 杨柳
%A 孙万儒
%J 微生物学报
%D 2006
%I 
%X N_氨甲酰基水解酶是一种非常具有工业应用价值的水解酶，可用于制备光学纯氨基酸。通过LA PCR 从 Sinorhizobium morelens S_5 菌中克隆到13kb的DNA片段，测序表明该片段上含有一个完整的N_氨甲酰基水解酶的基因（hyuC）序列。将hyuC基因克隆到表达载体pET30a上，重组质粒pET30a_HyuC在大肠杆菌中获得了高水平表达。重组的N_氨甲酰基水解酶经过热处理和三步柱色谱分离而纯化。纯化倍数为16.1倍，收率21.2%。该酶为同源四聚体，亚基分子量是38kDa。最适温度是60℃，最适pH为7.0。该酶有较高的热稳定性和氧化稳定性。Fe2+和Ca2+对酶的活性有一定的促进作用，而金属螯合剂和巯基试剂对酶活无明显影响。
%K Sinorhizobium
%K morelens
%K N_氨甲酰基水解酶基因
%K 蛋白纯化
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=3B6E2EBE28BDAA2767B01710A947EF27&yid=37904DC365DD7266&vid=D997634CFE9B6321&iid=E158A972A605785F&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0