%0 Journal Article
%T Establishment of a 293-cell line containing luciferase reporter for EIAV receptor and LTR functions<br>表达马传染性贫血病毒受体和荧光素酶报告基因的293细胞系的建立
%A WANG Deng-feng
%A ZHANG Shu-qin
%A MA Xue-en
%A JIAN Zi-jian
%A ZHOU Jian-hua
%A <br>王登峰
%A 张淑琴
%A 马学恩
%A 简子建
%A 周建华
%J 微生物学报
%D 2007
%I 
%X 为了在体外精确、简便地测定马传染性贫血病毒(EIAV)的中和抗体和研究不同毒株与受体的亲和性,克隆了马慢病毒受体1(ELR1)cDNA并插入真核表达载体pcDNA3.1( ),构建了表达载体pELR1。该载体瞬时转染293细胞后,经Western blot和间接免疫荧光(IFA)检测,确认了ELR1的表达。在pELR1质粒的基础上,插入EIAV疫苗株前病毒基因组转录调控区LTR以及萤火虫荧光素酶报告基因(Luc)构建了表达载体pELR1-LTR-Luc,并转染293细胞,建立了ELR1-LTR-Luc(293-E)细胞系。该细胞系能稳定表达ELR1基因,并且能在LTR的调控下表达萤火虫荧光素酶基因。用1000TCID50的EIAV驴胎皮肤细胞疫苗株D18V13接种该细胞,24h后检测其荧光素酶活性是未接毒对照的3.15倍。同时用IFA检测证明了病毒在细胞内的增殖。EIAV强毒株L21的接毒试验显示,ELR1-LTR(293-E)细胞的萤火虫荧光素酶活性与该毒株的接毒量在10-2~10-7稀释范围内呈正相关。该细胞系传35代后,外源基因的表达特征未发生改变。该细胞系的建立为进一步开展EIAV与细胞受体相互作用以及中和抗体评价等研究奠定了重要基础。
%K EIAV
%K LTR<br>受体
%K 荧光素酶
%K 细胞系
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=ED2CC2FD33A6F13BA7FABA3527D3D384&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=F4B561950EE1D31A&iid=B31275AF3241DB2D&sid=A50445FB05D4B1A0&eid=6A12B9FCEF71AE29&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=1&reference_num=16