%0 Journal Article
%T 嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶基因的cDNA克隆及表达
%A 郭润芳
%A 李多川
%J 微生物学报
%D 2006
%I 
%X 根据Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶Chit的N端氨基酸序列和同源保守序列设计简并引物，通过RTPCR及快速扩增cDNA末端（RACE）的方法，克隆了该几丁质酶的编码基因chit，全长cDNA为1500bp，包含一个由442个氨基酸组成的开放阅读框。该基因已在GenBank中注册，登录号为DQ092332。将成熟肽几丁质酶Chit阅读框与酵母表达载体pPIC9K连接，构建重组质粒pPIC9K/chit，转化毕赤酵母GS115，在甲醇的诱导下，成功地分泌出具生物活性的几丁质酶，诱导6d后酶活性达2.261U/mL，酶蛋白表达量为0.6mg/mL。该酶的最适反应温度和pH 值分别为60℃和5.5，该酶在50℃以下稳定；65℃的半衰期为40min。
%K 几丁质酶
%K RACE
%K 同源性
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=1B4A4434584BCB4806E53AC23093FD92&yid=37904DC365DD7266&vid=D997634CFE9B6321&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0