%0 Journal Article %T Expression of Human Intestinal Trefoil Factor (hITF) in Transgenic Pleurotus ostreatus and Its ELISA Assay
人小肠三叶因子在糙皮侧耳中的整合、表达及检测 %A XU Xiao-Jing %A ZHANG Jing %A LI Xi %A YU Mei-Min %A RU Bing-Gen %A
徐晓晶 %A 张竞 %A 李曦 %A 俞梅敏 %A 茹炳根 %J 微生物学报 %D 2004 %I %X 用原生质体法将含双 35S_AMV启动子及人小肠三叶因子 (hITF)cDNA的表达载体导入糙皮侧耳 (Pleurotusostreatus)中 ,原生质体转化子在含有除草剂的培养基上初步筛选 ,获得抗性菌株。通过PCR分析证明hITFcDNA已整合到侧耳基因组中。以hITF为抗原免疫家兔制备了抗血清 ,纯化后的IgG以直接型酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法测定效价 ,并建立起hITF的竞争型酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法 ,给出了标准工作曲线 ,以应用于大规模表达菌株的筛选确立。检测表明 ,hITF在侧耳新鲜菌丝体中分 3个表达量段 :10 0 0~ 12 5 0ng g、14 80~ 170 0ng g、最高达2 0 0 0~ 2 2 5 0ng g ,约占总可溶性蛋白的 0 7%~ 1 5 %。Western印迹进一步分析证明hITF在侧耳中的表达。 %K Human intestinal trefoil factor (hITF) %K Pleurotus ostreatus %K Competitive ELISA
人小肠三叶因子(hITF) %K 糙皮侧耳 %K 竞争型ELISA %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=98723E8A9F47FB8B&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=1AE5323881A5ECDC&iid=94C357A881DFC066&sid=5568599C60D4BE87&eid=EF9E84B2DA79FF23&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=14