%0 Journal Article
%T Over-expression of Fungal Cytochrome P450nor Gene in Sf9 Cells by Using Bac to Bac Baculovirus Expression System<br>利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在Sf9细胞中表达真菌细胞色素P450nor
%A Abstract
%A <br>周建刚
%A 江月
%A 段媛媛
%A 彭建新
%A 刘德立
%J 微生物学报
%D 2004
%I 
%X 利用BactoBac杆状病毒载体表达系统将真菌细胞色素P450nor基因克隆至转移载体pFastBac1中, 得到重组质粒pFastBacP450nor, 再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中发生转座作用, 得到含P450nor基因的重组穿梭载体rBacmid pAcP450nor。分离提取重组Bacmid DNA, 并转染培养的昆虫细胞Sf9, 得到重组病毒rAcp450nor。经酶切和PCR 鉴定, 细胞色素P450nor基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下, SDSPAGE分析证明：表达蛋白的分子量为43kD左右。Western blotting分析结果表明：有一条特定的杂交带存在, 且分子量相同（约43kD）。进一步证明了含有真菌细胞色素P450nor基因的重组表达载体和重组病毒构建成功，并在昆虫细胞Sf9中实现了高效表达, 经MTT法测定表达的细胞色素P450nor具有还原NO的生物学活性。
%K Cytochrome P450nor
%K Bac-to-Bac system
%K Over-expression<br>BactoBac系统
%K 细胞色素P450nor
%K 高效表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=21D7EA8D1CBF6D33&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=1AE5323881A5ECDC&iid=0B39A22176CE99FB&sid=6425DAE0271BB751&eid=7EBE588F611589FC&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=29