%0 Journal Article
%T Effect of phosphoenolpyruvate carboxylase gene knock-out on metabolism in Corynebacterium pekinense PD-67<br>磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的敲除对北京棒杆菌PD-67 的生理代谢的影响
%A Mintao Lu
%A Zhi Zhao
%A Yingzi Zhang
%A Yu Wang
%A Jiuyuan Ding
%A <br>陆敏涛
%A 赵智
%A 张英姿
%A 王宇
%A 丁久元
%J 微生物学报
%D 2010
%I 
%X 摘要：【目的】为了优化L-色氨酸合成的前体供应，构建北京棒杆菌PD-67（Corynebacterium pekinense PD-67）磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（EC:4.1.1.31，phosphoenolpyruvate carboxylase，PEPCx）基因ppc敲除的菌株，并研究ppc基因敲除对菌株生理特性的影响。【方法】运用PCR技术扩增ppc基因的上游和下游序列，构建带有目标基因内部缺失的基因整合载体。通过同源重组技术将C. pekinense PD-67的ppc基因敲除，构建ppc基因缺陷突变株C. pekinense PD-67-Δppc。通过摇瓶发酵研究突变株的生理特性，并测定突变株丙酮酸激酶和丙酮酸羧化酶的活性。【结果】PCR验证和PEPCx活性分析结果表明，筛选到ppc缺陷的突变株。摇瓶发酵结果表明，与出发菌株相比，突变株的生长速率下降，生物量降低20%，L-色氨酸积累降低62%，丙酮酸激酶活力提高，而丙酮酸羧化酶活力下降。【结论】C. pekinense PD-67的ppc基因敲除以后，对菌株的代谢影响较大。仅通过阻断PEPCx催化的回补途径，减少磷酸烯醇式丙酮酸的分支代谢，不能提高该菌株L-色氨酸的积累。
%K Keywords: Corynebacterium pekinense
%K phosphoenolpyruvate carboxylase
%K gene knock-out
%K L-tryptophan<br>关键词：北京棒杆菌
%K 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶
%K L-色氨酸
%K 基因敲除
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=6796E6F305EB70FC0E3C2FFA51B1C3A2&yid=140ECF96957D60B2&vid=771152D1ADC1C0EB&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=C0C56F7E9227DF7D&eid=CEEFA682892739FB&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0