%0 Journal Article
%T GL-7-ACA酰化酶的分离纯化及性质研究
%A 周宏伟
%A 魏中荻
%A 杨蕴刘
%A 焦瑞身
%J 微生物学报
%D 1997
%I 
%X CU334是高表达GL-7-ACA酰化酶工程菌,其菌悬液用超声波处理后,经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、DEAE—纤维素DE-52柱层析、Sephadex G-200凝胶过滤及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的GL-7-ACA酰化酶蛋白,纯化了22倍,得率4.0％,比活力为13.8U/mg。用浓度梯度PAGE测得GL-7-ACA酰化酶的分子量为134kD,用SDS-PAGE测得两个亚基分子量分别为15.5kD和58.4kD。用PI法测得等电点为3.5。GL-7-ACA酰化酶反应最适pH为7.0。反应最适温度为37℃,GL-7-ACA酰化酶对底物GL-7-ACA的K_m值为0.50mmol/L,V_(max)为13.10U·mg~(-1)。Ca2+、EDTA和巯基乙醇对该酶有激活作用,Cu2+、Fe2+和Mg2+等有一定程度的抑制作用。产物7-ACA、戊二酸均为GL-7-ACA酰化酶的反竞争性抑制剂,其K_1值分别为16.58mmol·L~(-1)和9.88mmol·L~(-1)。
%K CU334
%K GL-7-ACA酰化酶
%K 纯化和性质
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=E9D65A87AEB385DBCD5FD16330B2E387&yid=5370399DC954B911&vid=42425781F0B1C26E&iid=38B194292C032A66&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0