%0 Journal Article
%T Expression optimization of rice bacterial blight resistance gene Xa21 and blast resistance gene Pi-d2 protein kinases in Pichia Pastoris<br>水稻白叶枯病抗性基因Xa21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化
%A Xiaoming Li
%A Shuli Wang
%A Liyun Li
%A Xiaobing Li
%A Jing Wang
%A Guozhen Liu
%A <br>李晓明
%A 王书利
%A 李莉云
%A 李晓兵
%A 王静
%A 刘国振
%J 微生物学报
%D 2010
%I 
%X 摘要：【目的】白叶枯病和稻瘟病是最主要的水稻病害，Xa21是水稻白叶枯病抗性基因，Pi-d2是稻瘟病抗性基因，二者都编码类受体激酶蛋白质。本研究旨在毕赤酵母系统中表达XA21和PI-D2激酶蛋白质。 【方法】用Xa21和Pi-d2的激酶区PCR产物，构建了pPICZαA-Xa21K、pPICZαA-Pi-d2K重组质粒，酶切及测序验证后，将重组质粒线性化，转化到毕赤酵母菌株中，系统地比较了不同酵母菌株（KM71、GS115、X33），不同甲醇浓度（1%、2%、3%），不同pH(pH5、pH6、pH7、pH8)值，不同诱导时间（24 h、48 h、72 h）条件下激酶蛋白质的表达情况。【结果】XA21和PI-D2激酶蛋白质可以在毕赤酵母中表达，但表达的蛋白质不能分泌到培养基上清中，而只能在菌体中检测到，对表达条件的系统比较发现，毕赤酵母菌株KM71和X33、2%的甲醇诱导浓度、pH5和48 h以上的诱导时间有利于激酶蛋白质的表达，最后我们在酵母裂解物上清中获得了纯化的考染可见的激酶蛋白质。【结论】在毕赤酵母中表达了XA21和PI-D2激酶蛋白质，为下一步生化特性研究奠定了基础。
%K Keywords: rice
%K bacterial blight
%K rice blast
%K disease resistance gene
%K Pichia pastoris yeast
%K protein expression<br>关键词:
%K 水稻
%K 白叶枯病
%K 稻瘟病
%K 抗病基因
%K 毕赤酵母
%K 蛋白质表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=4DC2314ECC2C6EDBD139F3312643832D&yid=140ECF96957D60B2&vid=771152D1ADC1C0EB&iid=94C357A881DFC066&sid=9A596D09E9486F3E&eid=6C62BFE34266FA92&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0