%0 Journal Article
%T Construction and safety,immunogenicity analysis of attenuated Salmonella typhimurium harbouring TGEV DNA vaccine<br>携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析
%A Heng Yang
%A Jiawen Liu
%A Sanjie Cao
%A Xiaobo Huang
%A Xin-tian Wen
%A <br>杨恒
%A 刘佳文
%A 曹三杰
%A 黄小波
%A 文心田
%J 微生物学报
%D 2009
%I 
%X 【目的】探讨以减毒沙门氏菌为载体，进行TGEV DNA疫苗口服免疫可行性。【方法】通过RT-PCR扩增TGEV四川株（SC-H）S基因5’端约2.1 kb的主要抗原位点片段，将其插入真核表达载体pVAX1，构建重组质粒pVAX-S，体外转染COS7细胞，间接免疫荧光检测S基因表达。通过电转化将pVAX-S转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207，构建SL7207（pVAX-S）重组菌，并在体外感染小鼠腹腔巨噬细胞，以RT-PCR、间接免疫荧光检测细胞内S基因的转录与表达情况。将SL7207（pVAX-S）重组菌以5×108、1×109、2×109CFU剂量口服接种BALB/c小鼠，分析其安全性，并以1×109CFU剂量的重组菌3次免疫BALB/c小鼠，通过间接ELISA检测免疫小鼠的血清IgG与肠道粘膜IgA抗体。【结果】成功构建重组质粒pVAX-S，且重组质粒能在COS7细胞中表达。重组菌SL7207（pVAX-S）感染巨噬细胞后检测到目的基因的转录、表达。小鼠口服接种不同剂量重组菌，具有良好的安全性。免疫小鼠于二免后两周可检测到针对TGEV S蛋白的特异性血清IgG与肠道粘膜IgA抗体，且三免后两周与SL7207（pVAX1）空载体免疫组间分别存在显著性差异（P<0.05）和极显著性差异（P<0.01）。【结论】携带TGEV DNA疫苗的减毒沙门氏菌小鼠试验显示了良好的免疫原性与安全性。
%K Transmissible gastroenteritis virus
%K S gene
%K attenuated Salmonella
%K DNA vaccine
%K safety
%K immunogenicity<br>猪传染性胃肠炎病毒
%K S基因
%K 减毒沙门氏菌
%K DNA疫苗
%K 安全性
%K 免疫原性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=0C6C76FA74384E91C597466097F6F95B&yid=DE12191FBD62783C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=AA76E167F386B6B3&eid=E44E40A2398D4F2A&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=2&reference_num=16