%0 Journal Article
%T Establishment of reverse genetics system for H5N1 subtype AI<br>H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立
%A LONG Jin-xue
%A WU Yan-tao
%A ZHANG Xiao-rong
%A WANG Qu-zhi
%A LIU Xiu-fan
%A <br>龙进学
%A 吴艳涛
%A 张小荣
%A 王曲直
%A 刘秀梵
%J 微生物学报
%D 2006
%I 
%X 选择鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成了全基因组序列测定基础上,设计合成的11对引物对病毒的8个基因分11段进行扩增。通过与转录载体PHW2000连接,构建A/SD/04的8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒:2412、42、243、244、245、246、247和248。A/SD/04的8质粒与PR8(H1N1)进行不同组合的拯救,获得8个均含A/SD/04 HA基因的H5重组流感病毒。鸡胚尿囊液中重组病毒的血凝效价在28~210,EID50在10-8.5~10-9之间,MDT在34~46h之间,均与野生A/SD/04(wt A/SD/04)相似。重组病毒对6周龄的SPF鸡的静脉接种指数(IVPI)与wt A/SD/04却有明显的差异,说明不同组合的内部基因影响病毒对鸡的致病力,但不影响病毒的鸡胚致死能力、对鸡胚的感染能力和病毒在鸡胚中的繁殖能力。构建的A/SD/04的8个质粒拯救系统,为H5N1的基因功能研究和新型疫苗开发奠定基础。
%K H5N1 subtype influenza A virus
%K Eight-plasmid system
%K Virus rescue
%K Reassorted virus<br>H5N1亚型禽流感病毒
%K 8质粒拯救系统
%K 病毒拯救
%K 重组病毒
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=D4DE781A1921889C&yid=37904DC365DD7266&vid=D997634CFE9B6321&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=E514EE58E0E50ECF&eid=6AC2A205FBB0EF23&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=9&reference_num=12