%0 Journal Article
%T Cloning and expression of arom gene of Sclerotinia sclerotiorium<br>核盘菌arom基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达
%A YU Han-ying
%A YANG Qian
%A <br>于寒颖
%A 杨谦
%J 微生物学报
%D 2006
%I 
%X 核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)arom基因已经被克隆、测序。该基因编码的AROM蛋白是芳香族氨基酸合成途径中催化第二步到第六步的五功能多肽。为了对扩增的核盘菌arom基因进行功能验证和探索大量获得AROM蛋白的成熟方法,克隆了arom基因的编码框序列,并将其与载体pYES2连接,构建了酵母表达载体pYES2-arom。用LiAc/SSDNA/PEG方法将该表达载体转入酿酒酵母H158(Saccharomyces cerevisiaeH158)中。酶活测定、RT-PCR和Northern杂交结果显示,核盘菌arom基因在酿酒酵母胞内获得了表达,转化子具有AROM蛋白结构域之一5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶的催化活性。不同培养时间取样样品的酶活检测结果表明,当转化子在30℃的条件下,在SC-U酵母尿嘧啶营养缺陷型选择培养基中以180r/min被振荡培养时,其外源AROM蛋白的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶酶活在培养72h达到最高。
%K Sclerotinia sclerotiorum
%K Arom gene
%K Gene expression
%K Saccharomyces cerevisiae<br>核盘菌
%K arom基因
%K 基因表达
%K 酿酒酵母
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=3727812B143536C8&yid=37904DC365DD7266&vid=D997634CFE9B6321&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=BE33CC7147FEFCA4&eid=F4B561950EE1D31A&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=12