%0 Journal Article
%T HBscFv–IFNγ在毕赤酵母X33中的表达、纯化及鉴定
%A 周世水
%A 王小宁
%J 微生物学报
%D 2008
%I 
%X 为了有效治疗乙肝病而研究了将抗乙肝病毒表面抗原单链抗体(single-chain Fv against HBV surface antigen, HBscFv)与临床治疗乙肝常用的γ-干扰素(γ-interferon, IFNγ)连接的融合蛋白(HBscFv-IFNγ)。采用重叠PCR法将基因hbscfv与ifnγ连接成hbscfv-ifnγ, 再构建成多拷贝重组质粒pPICZαA/(hbscfv-ifnγ)1,2,4, 然后转入巴斯德毕赤酵母X33。从中筛选出的工程菌株X4能够分泌表达目的蛋白HBscFv-IFNγ, 并用SDS-PAGE、Western blotting和ELISA方法进行了初步鉴定, 结果表明组成HBscFv-IFNγ的HBscFv和IFNγ仍具有生物学活性。用14F7亲合层析纯化X4的发酵液可获得纯度达95%~98%的HBscFv-IFNγ。它可中和HBV转基因小鼠血清中27.9%的乙肝病毒表面抗原(HBV surface antigen, HbsAg), 这表明HBscFv-IFNγ上的抗体能够与生物体内的HBV有效结合。可见, HBscFv-IFNγ将是一种防治乙肝病而有开发前景的靶向新药。
%K 重叠PCR
%K HBscFv-IFNγ
%K 巴斯德毕赤酵母X33
%K 14F7亲合层析
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=546296164CA075B32C36046EECADFE1C&yid=67289AFF6305E306&vid=B91E8C6D6FE990DB&iid=38B194292C032A66&sid=F27A401E323B6FAD&eid=9BA67A0B76A3DBA8&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0