%0 Journal Article %T 利用Tn51063转座诱变法分离苜蓿中华根瘤菌042BMnoeB基因的研究 %A 杜秉海 %A 李小红 %A 林榕姗 %A 王磊 %A 杨苏声 %J 微生物学报 %D 2004 %I %X 采用三亲本杂交方法将带有Tn51063(含luxAB)的质粒pRL1063a导入苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)042BM,进行转座子插入诱变,在含有氯霉素、卡那霉素的TY平板上筛选接合子。通过结瘤试验,从1000个突变株中,筛选到3个结瘤突变株042BMR5、042BMR11和 042BRM29。它们都表现出发光酶活性,表明转座子正向插入到基因组中的某个启动子下游。Southern杂交结果证实,转座子均为单一位点插入。对042BMR5突变株基因组进行反向PCR,扩增位于Tn51063两端的侧翼序列。测序结果表明,转座子插入到苜蓿中华根瘤菌的共生质粒pSymA noeB基因内。根据基因组中noeB上游和下游序列扩增出042BM noeB,其与苜蓿中华根瘤菌1021 noeB的同源性为98%,而与NoeB蛋白的氨基酸序列相似性为95%。疏水性分析发现,NoeB是一个跨膜蛋白,在N末端有4个跨膜区,其中包含3个初级螺旋和1个次级螺旋。 %K Sinorhizobium %K meliloti, %K 结瘤基因, %K 发光酶活性, %K Tn51063 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=4DBE4F758A90CF740D637105EB35A04F&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=1AE5323881A5ECDC&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0