%0 Journal Article %T Cloning of mleP Gene from Oenococcus oeni and Expression in Saccharomyces cerevisiae
酒类酒球菌mleP基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 %A JIANG Si Xin %A LIU Yan Lin %A HE Xiu Ping %A GUO Xue Na %A ZHANG Bo Run %A
蒋思欣 %A 刘延琳 %A 何秀萍 %A 郭雪娜 %A 张博润 %J 微生物学报 %D 2004 %I %X 苹果酸通透酶具有协助苹果酸 乳酸发酵 (MLF)的重要功能。以酒类酒球菌 (Oenococcusoeni)优良菌系Oenococcus Lee SD 2a的总DNA为模板 ,用PCR方法克隆到苹果酸通透酶基因mleP ,构建了重组质粒pBMmleP。序列分析表明克隆到的基因序列与已报道的序列同源性为 99%。为使目的基因在酿酒酵母中表达 ,以大肠杆菌 酿酒酵母穿梭质粒YEp35 2为载体 ,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件 ,构建了重组表达质粒YEpmleP ,并转化酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)YS5 8。酵母转化子用含有亮氨酸、组氨酸和色氨酸的YNB平板筛选鉴定。获得的转化子在添加了L 苹果酸 (5g L)的培养基中培养 4d ;取培养液上清用HPLC检测 ,结果显示重组转化子YSP的培养液中L 苹果酸剩余含量均低于空载体转化子YS35 2 ,因此所得酵母重组转化子对苹果酸的转运能力有所提高 %K Oenococcus oeni %K mleP gene %K Cloning and expression %K Saccharomyces cerevisiae
酒类酒球菌 %K 苹果酸通透酶基因 %K 克隆与表达 %K 酿酒酵母 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=B4C516C63F9114A8&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=1AE5323881A5ECDC&iid=E158A972A605785F&sid=BC88D6B0750E09D1&eid=3FC4D669D19FF0C6&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=4&reference_num=12