%0 Journal Article %T Expression,Purification and Characterization of Arabinofuranosidase from Thermotoga maritima
极耐热性阿拉伯糖苷酶基因的表达、纯化及酶学性质研究 %A 薛业敏 %A 毛忠贵 %A 邵蔚蓝 %J 微生物学报 %D 2004 %I %X 采用PCR从海栖热袍菌(Thermotoga maritima)克隆出编码极耐热稳定性阿拉伯糖苷酶基因,以pET20b为表达质粒,与其C末端6个组氨酸标签序列融合,在大肠杆菌中得到高效表达。基因表达产物通过热处理和亲和层析柱纯化后,酶纯度达电泳均一。纯化重组酶稳定性检测表明,阿拉伯糖苷酶活性最适作用温度和最适作用pH分别为90~95℃和pH 5.0~5.5,在pH 4.2~8.2之间酶活力稳定,95℃的半衰期为4h;SDSPAGE测得酶的分子量为56.57 kD,与理论推算值相吻合。在所测定的底物中,阿拉伯糖苷酶仅对对硝基苯阿拉伯呋喃糖苷(pNPAF)有专一性水解作用,其动力学参数Km值为018mmol/L, Vmax为139μmol/min·mg。 %K Arabinofuranosidase %K Gene expression %K Purification %K Enzyme stability
阿拉伯糖苷酶 %K 基因表达 %K 重组酶纯化 %K 酶学性质 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=81F49CFFC57C66F7&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=1AE5323881A5ECDC&iid=0B39A22176CE99FB&sid=1D67BE204FBF4800&eid=4966445AEEBA9556&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=2&reference_num=47