%0 Journal Article
%T cDNA CLONING, SEQUENCING AND EXPRESSING IN E. COLI OF RNA3 OF BEET NECROSIS YELLOW VEIN VIRUS<br>甜菜坏死黄脉病毒RNA3序列分析及在大肠杆菌中的表达
%A Li Yi Wang Yan Liu Yifei Liang Xiaowen Chen Zhangliang
%A <br>李毅
%A 王琰
%A 刘一飞
%A 梁晓文
%A 陈章良
%J 微生物学报
%D 1995
%I 
%X 以G1株系的甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA3为模板,以Oligo(dT)_(15)为引物合成cDNA第一链,以RNA3特异引物合成cDNA第二链。然后将双链DNA克隆在pGEM3zf(+)载体中。通过限制性内切酶图谱分析,构建了五个亚克隆,完成全序列1776bp的序列测定(不含Poly(A)尾巴)。对核苷酸序列和推测的氨基酸序列分析结果发现,RNA3含三个开放阅读框架(ORF),分别编码三个多肽,即P25、P4.6和蛋白N。与法国F2株系RNA3在核昔酸水平上的同源率达96.8％,相应的CRF F25、ORF P4.6和ORFN编码多肽的同源率分别为93.6％、93.2％和92.3％。P25含一个钉指结构(zinc finger),和酸性及碱性区域;蛋白N为疏水蛋白。ORF以外的两端序列高度保守,且3'端可形成双发卡结构(double hairpin motif),说明这段序列在病毒侵染或复制中有十分重要的作用。进一步将RNA3 eDNA体外定点突变后使P25 ORS 与卢-半乳糖苷酶基因位于同一阅读框架以表达卢-半乳糖苷酶和P25融合蛋白,在诱导产物中检测到卢-半乳糖苷酶与P25的融合蛋白已在大肠杆菌…
%K Beet necrosis yellow vein virus
%K RNA3
%K Zinc finger
%K Double hairpin motif
%K Gene expression<br>甜菜坏死黄脉病毒
%K RNA3
%K 锌指结构
%K 双发卡结构
%K 基因表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=3C4F9590C2FB60F44A73A9ACCF5B404A&yid=BBCD5003575B2B5F&vid=6209D9E8050195F5&iid=B31275AF3241DB2D&sid=FED44C0135DC1D9C&eid=5335AD3CFE6E14EA&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=2