%0 Journal Article %T cDNA CLONING, SEQUENCING AND EXPRESSION OF RNA4 FROM BEET NECROTIC YELLOW VEIN VIRUS
甜菜坏死黄脉病毒RNA4 cDNA克隆、序列分析及其编码蛋白基因在大肠杆菌中的表达 %A Yu Jialin Han Chenggui Yang Lili Li Dawei Liu Yi %A
于嘉林 %A 韩成贵 %A 杨莉莉 %A 李大伟 %A 刘仪 %J 微生物学报 %D 1997 %I %X 以甜菜坏死黄脉病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus,简称BNYVV)内蒙分离物(NM)RNA为模板,通过反转录和PCR扩增得到了BNYVV RNA4基因组的cDNA克隆pGBF6。序列分析结果表明,pGBF6含有全长RNA4 cDNA插入片段,大小为1465个核苷酸,含有一个849个核苷酸的开放阅读框架,编码产生由282个氨基酸组成的分子量为31kDa的蛋白。与法国F2分离物RNA4相比,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为97.1%和96.4%,并在5'端非编码区比F2分离物缺失了3个核苷酸。将RNA4编码区cDNA克隆到原核表达载体pFLAG·MAC上,获得融合蛋白表达质粒pFMBF87。所构建的融合蛋白由载体序列编码的14个氨基酸和31kDa蛋白C端的233个氨基酸组成。经IPTG诱导,Westem blotting分析表明,该融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。本文还对内蒙分离物的株系划分进行了讨论。 %K BNYW %K RNA4 %K Sequence %K Prokaryotic expression %K Western blot
BNYVV %K RNA4 %K 序列分析 %K 原核表达 %K Western印迹 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=F521F4B9F3BBCAA53C1F203825D6AF82&yid=5370399DC954B911&vid=42425781F0B1C26E&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=3&reference_num=0