%0 Journal Article
%T 大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶的定位突变及突变酶的动力学性质
%A 褚西宁
%A 白玉明
%A 袁静明
%J 微生物学报
%D 1994
%I 
%X 利用人工合成的寡核苷酸探针,将编码大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶(EC3.2.1.23)的Lac Z基因中537位Glu密码子GAA分别用GAC(Asp)、CAA(Gln)、GTC(Val)来替代,替代后的突变酶的催化活性显著降低.同天然β-D-半乳糖苷酶相比,作用于ONPG底物时,突变酶的k_(cat)值分别为0.13%(Asp-537)、0.0006%(Gln-537)、0.0035%(Val-537),但它们的K_m值并无明显改变.无论是天然酶还是突变酶,底物类似物IPTG是一个强有力的抑制剂,而过渡态类似物2-脱氧-2-氨基-半乳糖和L-核糖只对突变酶有微弱的抑制作用.活化剂叠氮钠的激活作用小于β-D-半乳糖苷酶的Glu-461突变酶.催化甲醇成酯反应的能力小于天然酶.突变酶对热更不稳定.以上结果表明Glu-537残基是该酶催化反应的必需基团.
%K 大肠杆菌
%K β-D-半乳糖苷酶
%K 定位突变
%K 动力学性质
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=C9F7C0441C1017D2871AB1CD2440FF4C&yid=3EBE383EEA0A6494&vid=339D79302DF62549&iid=38B194292C032A66&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0