%0 Journal Article
%T Cloning of Trehalase Gene from Arabidopsis thaliana, Overexpression in E.coli and Its Functional Activity Assay in vitro<br>拟南芥海藻糖酶基因克隆及其在大肠杆菌中高效表达与功能研究
%A GUO Bei
%A HU Lei
%A GAI Ying
%A WANG Xi-Zhi
%A CHEN Xue-Mei
%A JIANG Xiang-Ning
%A <br>郭 蓓
%A 胡 磊
%A 盖 颖
%A 王喜智
%A 陈雪梅
%A 蒋湘宁
%J 微生物学通报
%D 2008
%I 
%X 从拟南芥幼苗中提取RNA,通过RT-PCR克隆得到海藻糖酶基因后,将其构建到原核高效表达载体pET30a( )上并在大肠杆菌BL21菌株中进行高效诱导表达,继而对纯化得到的海藻糖酶蛋白进行活性检测和酶学特性研究.实验结果表明,植物源的海藻糖酶基因在异体大肠杆菌中能够高效表达,纯化获得的海藻糖酶蛋白在试管条件下具有较高的海藻糖水解活性,其活性最适温度为45℃.通过GC-MS分离检测,可以明显地看到酶反应过程中底物海藻糖和产物葡萄糖的含量随反应时间变化的消长关系,这充分证明克隆基因在大肠杆菌中的表达产物具有海藻糖酶的功能.
%K Arabidopsis thaliana
%K Trehalase
%K Gene cloning
%K Functional expression<br>拟南芥
%K 海藻糖酶
%K 基因克隆
%K 功能表达
%K 拟南芥
%K 海藻糖酶
%K 酶基因克隆
%K 大肠杆菌
%K 高效表达载体
%K 功能研究
%K Arabidopsis
%K thaliana
%K Gene
%K Trehalase
%K Cloning
%K in
%K vitro
%K Activity
%K Assay
%K Functional
%K 克隆基因
%K 消长关系
%K 时间变化
%K 反应过程
%K 葡萄糖的含量
%K 分离检测
%K 最适温度
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=EFF6AD9960EBAD7AD7E827B255DAA934&yid=67289AFF6305E306&vid=6209D9E8050195F5&iid=0B39A22176CE99FB&sid=50D102FFD24F6E37&eid=8370F440954AB241&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=15