%0 Journal Article
%T High-level Expression, Solubilization and Purification of Chemokine Receptor CXCR4b in Escherichia coli<br>趋化因子受体CXCR4b在大肠杆菌中的高效表达、增溶及纯化
%A SUN Hai-Xiang
%A GE Bao-Sheng
%A XU Yao
%A <br>孙海翔
%A 葛保胜
%A 许耀
%J 微生物学通报
%D 2010
%I 
%X 膜蛋白在细胞分化、信号转导等生理活动中发挥着重要作用, 然而膜蛋白结构与功能的研究却受到高质量蛋白制备的严重制约。将斑马鱼趋化因子受体CXCR4b基因克隆到pMAL-p4x表达载体中, 在大肠杆菌TB1中表达麦芽糖结合蛋白(MBP)-CXCR4b融合蛋白。通过系统优化其发酵表达条件, 实现了CXCR4b的过量表达。最佳表达条件为: 宿主菌选用大肠杆菌TB1, TB培养基, 诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L, 诱导时机为对数中后期。通过对10种不同表面活性剂的筛选, 发现DM、FC-14和Brij35等表面活性剂对CXCR4b有较好的增溶效果。利用Ni2+亲和色谱和S200凝胶色谱两步纯化, 得到CXCR4b的纯度可达90%以上。圆二色谱检测显示纯化的CXCR4b呈典型的α螺旋结构。
%K G protein coupled receptor
%K chemokine receptor CXCR4b
%K expression optimization
%K purification
%K surfactant<br>G蛋白偶联受体
%K 趋化因子受体CXCR4b
%K 表达优化
%K 纯化
%K 表面活性剂
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=93334CF4BB33E499EDA87A7FB3E66872&yid=140ECF96957D60B2&vid=42425781F0B1C26E&iid=94C357A881DFC066&sid=7557970A740588AD&eid=E8AECBA877D3CE92&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=0