%0 Journal Article
%T Enzymatic Characterization of a Novel Glucose-tolerant β-glucosidase from Agrobacterium tumefaciens<br>重组根瘤农杆菌葡萄糖耐受型β-葡萄糖苷酶性质
%A GUO Hua
%A BIAN Ying-Nan
%A LIU Rui
%A ZHENG Mao-Fa
%A HUANG Wei-Da
%A <br>郭华
%A 边英男
%A 刘锐
%A 郑茂发
%A 黄伟达
%J 微生物学通报
%D 2010
%I 
%X 目前已发现的葡萄糖耐受型β-葡萄糖苷酶均来源于真菌, 尚无原核细胞来源的相关报道。从根瘤农杆菌LBA4404中克隆β-葡萄糖苷酶基因bg1, 将其构建在表达载体pET-28b上, 转化Escherichia coli RP (DE3), IPTG诱导表达。重组β-葡萄糖苷酶的比活高达36.7 μmol/(min·mg)。对经过Ni柱纯化的重组酶进行酶学分析发现: 该酶是糖基水解酶家族1的成员, 底物亲和力高, 专一性低, 在温度为40°C和pH在5-8之间时具有较高的酶活, 在低于40°C和pH 5-10之间时可稳定保存。以pNP-β-Glc为底物, 该酶的最适pH为6.4, 最适温度为60°C, 在37°C和pH 6.4的反应体系中, 该酶的Km为0.09 mmol/L, 竞争性抑制剂葡萄糖酸-δ-内酯和葡萄糖的Ki分别为0.03 mmol/L和75 mmol/L, 具有很高的葡萄糖耐受性, 当金属离子Ag+和Zn2+存在时, 酶活被明显抑制。该酶对pNP-β-Gal和pNP-α-Glc的Km分别为3.61 mmol/L和14.31 mmol/L。
%K β-葡萄糖苷酶
%K 根瘤农杆菌LBA4404
%K 葡萄糖耐受性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=0AD3D8E9AD02EAB6BB097ADB61B94060&yid=140ECF96957D60B2&vid=42425781F0B1C26E&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=37E1CFF130ACDBB2&eid=700C99D38A660C7C&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=0