%0 Journal Article
%T Over-expression of Highly Active Triphenylmethane Dyes Decolorization Enzyme (TpmD) Induced by Lactose Instead of IPTG in Escherichia coli BL21 (DE3)<br>乳糖替代IPTG诱导脱色酶TpmD基因在大肠杆菌中的高效表达
%A CHEN Liang
%A REN Sui-Zhou
%A XU Mei-Ying
%A SUN Guo-Ping
%A <br>陈 亮
%A 任随周
%A 许玫英
%A 孙国萍
%J 微生物学通报
%D 2009
%I 
%X 本文考察了乳糖代替IPTG诱导三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性, 分别对用乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式进行优化并与IPTG诱导的差异等方面进行了比较分析, 确定了乳糖诱导的最佳条件。结果表明, 在工程菌对数生长中期(OD600约为0.8)添加终浓度为0.4 mmol/L的乳糖诱导6 h的条件下能获得最大量的目的蛋白和菌体量。由于乳糖可以作为碳源被菌体利用, 分批添加乳糖效果优于一次性添加。乳糖诱导条件下目的蛋白表达量占总蛋白的35.62%, 与IPTG诱导条件下的35.03%无明显差异。乳糖诱导后外源蛋白的表达时间有所滞后, 但收获的菌体量高于IPTG诱导, 显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂, 可以代替昂贵的IPTG用于脱色酶TpmD的规模化发酵, 同时也为其他重组蛋白的生产提供了有益的参考和借鉴。
%K Lactose introduction
%K IPTG
%K TpmD
%K T7 promoter<br>乳糖诱导
%K IPTG
%K TpmD
%K T7启动子
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=2CB6777518C45D22D65D29AFF8D52570&yid=DE12191FBD62783C&vid=933658645952ED9F&iid=E158A972A605785F&sid=08CD5454E36A9812&eid=000E5B8167E671AF&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=1&reference_num=20