%0 Journal Article
%T Co-expression of trpBA and serA Genes in Escherichia coli<br>大肠杆菌trpBA和serA基因的串联表达
%A ZHANG Xu-Mei
%A GUO Chang-Jiang
%A LIU Yun
%A XU Qi-Shou
%A <br>张绪梅
%A 郭长江
%A 刘 云
%A 徐琪寿
%J 微生物学通报
%D 2009
%I 
%X 大肠杆菌trpBA基因编码的色氨酸合成酶(tryptophan synthetase, TSase)是色氨酸合成的关键酶; serA基因编码的磷酸甘油酸脱氢酶(D-3-phosphoglycerate-dehydrogenase, PGDH)为L-丝氨酸合成(色氨酸合成的底物)的关键酶。为了通过基因工程手段来增加色氨酸的产量, 在利用高效的原核表达载体pET22b(+)分别对trpBA和serA基因克隆表达的基础上, 采用PCR方法扩增了抗反馈抑制的serA和trpBA基因, 将两基因串联于pET22b(+)载体上, 共构建了4种方式的串联质粒, 实现了2种蛋白酶在大肠杆菌中的共表达。聚丙烯酰胺电泳分析显示, ABA-Ⅰ重组菌株在37 kD (PGDH)、29 kD(色氨酸合成酶的α亚基)、44 kD(β亚基)处均有明显的蛋白表达带。4种串联表达质粒重组菌的TSase酶活性, 分别比含空载体菌相应酶的活性提高2~4倍, PGDH酶活性分别提高约2.1~3.6倍。经摇瓶发酵实验表明酶活性较高的ABA-I菌株色氨酸合成量亦最高, 约为对照菌株的20.2倍。
%K Tryptophan
%K Escherichia coli
%K serA
%K trpBA
%K Co-expression<br>色氨酸
%K 大肠杆菌
%K serA基因
%K trpBA基因
%K 串联表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=F54FD72CDFAA23B308478A684714D60E&yid=DE12191FBD62783C&vid=933658645952ED9F&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=5E41CE837C38D79C&eid=146B749C39542531&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=1&reference_num=0