%0 Journal Article
%T High Expression of the Human Antibacterial Peptide LL-37 in Pichia pastoris and the Detection of Its Activity<br>人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测
%A SHEN Yan-Min
%A WEI Jian-Chao
%A SHANG Shu-Wen
%A NIU Ming-Fu
%A ZHOU Yu-Zhen
%A ZHOU-Bin
%A CAO Rui-Bing
%A CHEN Pu-Yan
%A HOU Ji-Bo
%A <br>申艳敏
%A 魏建超
%A 尚书文
%A 牛明福
%A 周玉珍
%A 周 斌
%A 曹瑞兵
%A 陈溥言
%A 侯继波
%J 微生物学通报
%D 2008
%I 
%X 根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列,选择毕赤酵母偏好密码子,采用SOE 方法合成了人源抗菌肽LL-37基因.所合成的LL-37基因全长为141 bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗茵肽具有天然N端.基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-LL-37.pPICZα-A-LL-37经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33.PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌LL-37于发酵上清液,其表达量为206mg/L.表达产物LL-37耐热性强,在100℃条件下40 min内抗茵活性不变,煮沸3 h以上仍具有活性.琼脂糖孔穴扩散法检测显示LL-37对多种革兰氏阴性茵和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌Cowan I (Staphylococcus aureus)、致病性大肠杆菌K99(Enteropathogenic E.coli)和鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)分别为1.56 μg/mL、3.12 μg/mL和1.56 μg/mL.
%K Antibacterial peptide LL-37
%K Genetic modification
%K Secretion expression
%K Detection activity<br>抗菌肽LL-37
%K 基因设计
%K 分泌表达
%K 活性检测
%K 人源
%K 抗菌肽
%K 毕赤酵母
%K 高效表达
%K 活性检测
%K Activity
%K Detection
%K Pichia
%K pastoris
%K Peptide
%K Antibacterial
%K Human
%K Expression
%K Minimal
%K Inhibitory
%K Concentration
%K 最小抑菌浓度
%K Salmonella
%K 鸡白痢沙门氏菌
%K coli
%K 大肠杆菌
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=2C6AEE10DC3413B3C2CB338EE88EEB6F&yid=67289AFF6305E306&vid=6209D9E8050195F5&iid=E158A972A605785F&sid=1C504D67A71E96F6&eid=6E1E123B17C81987&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=9