%0 Journal Article
%T Cloning and Expression of Pneumococcal Surface Protein A and Its Cross-immunoreactivity<br>肺炎球菌表面蛋白A(PspA)的克隆表达及交叉免疫作用
%A LIN Zi-Lin
%A LIN Hai-Ying
%A WANG Yuan-Yuan
%A BAI Kai-Kai
%A GUO Yang-Hao
%A <br>林子琳
%A 林海英
%A 汪媛媛
%A 白锴凯
%A 郭养浩
%J 微生物学通报
%D 2009
%I 
%X 本工作从中国临床最常见的5种荚膜血清型肺炎链球菌(FY01, FY05, FY6B, FY19F, FY23F)克隆获得编码PspA蛋白N端α-螺旋区的基因片段。分别将5种PspA基因片段克隆到表达载体pET-27b(+)上, 成功构建重组质粒pET-pspA, 转化大肠杆菌BL21(DE3)。经乳糖诱导表达和亲和层析分离, 获得高纯度重组蛋白。通过家族专属引物PCR的方法鉴定这5种荚膜血清型肺炎球菌的PspA蛋白所属家族, 并进一步根据基因测序结果通过生物信息学方法鉴定了所属支系。FY01 rPspA、FY6B rPspA、FY19F rPspA同属于家族Ⅰ支系1, FY05 rPspA属于家族Ⅰ支系2, FY23F rPspA属于家族Ⅱ支系3。以FY01 rPspA免疫小鼠, 在20 μg/mL免疫剂量时抗体滴度达到1: 210000, 显示了重组蛋白较好的免疫原性。Western blotting交叉免疫反应性研究表明, 抗FY01 rPspA抗血清与FY01 rPspA、FY6B rPspA和FY19F rPspA反应性较好, 而与另外两种重组蛋白几乎无反应, 提示PspA交叉免疫作用仅限于本支系内。动物保护实验表明, FY01 rPspA免疫的小鼠对FY6B、FY01 两种菌的攻击具有较好的保护作用, 对FY05、FY23F的攻击未见明显的保护作用。本研究成果对于研制高效肺炎球菌疫苗具有重要的指导意义。
%K Pneumococci surface protein A(PspA)
%K Clone and expression
%K Cross-immunoprotection
%K Family of PspA
%K Clade of PspA<br>肺炎球菌表面蛋白A(PspA)
%K 交叉保护作用
%K 家族
%K 支系
%K 克隆表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=B0C716AB4B48AA7FA8F349763A58A401&yid=DE12191FBD62783C&vid=933658645952ED9F&iid=B31275AF3241DB2D&sid=9120D8B6E9430432&eid=857318ED673A00A3&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=1&reference_num=10