%0 Journal Article
%T Expression and Identification of the PadhE-1 from Thermoanaerobacter ethanolicus JW200 and Its Binding with adhE Promoter in vitro<br>嗜热厌氧乙醇杆菌调控因子PadhE-1的分离、重组表达及其与adhE基因启动子的结合
%A PEI Jian-Jun?
%A ZHOU Qing?
%A QU Wei
%A SHAO Wei-Lan
%A <br>裴建军?
%A 周庆?
%A 曲威
%A 邵蔚蓝
%J 微生物学通报
%D 2010
%I 
%X 嗜热厌氧乙醇杆菌发酵是生产纤维素乙醇的有效途径, 而嗜热厌氧乙醇杆菌醛/醇脱氢酶(AdhE)是其乙醇代谢途径中的关键酶。以adhE启动子区域的DNA序列(TRRadhE)作为诱饵, 通过制备核酸亲和层析柱, 利用调控因子与DNA特异性结合的特点, 得到调控因子PadhE-1。经过蛋白测序和NCBI数据库的比对, 发现其N端序列与Thermoanaerobacter pseudethanolicus 39E的LacI家族转录调控因子 (GenBank accession No. YP_001665770)有90%的同源性。根据同源性设计引物, 从嗜热厌氧乙醇杆菌JW200基因组中通过PCR扩增得到调控因子PadhE-1的基因, 并克隆到表达载体pET-28a得到重组质粒pET-PadhE。转化大肠杆菌JM109 (DE3), 经IPTG诱导表达, Ni2+亲和柱纯化, 得到重组表达的调控因子PadhE-1。体外凝胶阻滞实验证实PadhE-1能与TRRadhE特异性结合。这将有助于我们了解嗜热厌氧乙醇杆菌的乙醇代谢调控机理。
%K Thermoanaerobacter ethanolicus JW200
%K Regulator
%K Affinity chromatography
%K Electrophoretic mobility shift assay<br>嗜热乙醇杆菌JW200
%K 亲和层析
%K 调控因子
%K 凝胶阻滞
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=F94470EC1F818481BFE2FB3E2E00473B&yid=140ECF96957D60B2&vid=42425781F0B1C26E&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=76DA548BC2ECBC62&eid=CAF3E71A6764366D&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=0