%0 Journal Article %T 泰山土壤宏基因组DNA中耐热b-半乳糖苷酶基因的克隆、表达及性质 %A 魏 萍 %A 宋文刚 %A 郝岗平 %J 微生物学通报 %D 2008 %I %X 从泰山土壤宏基因组文库中发现可能的b-半乳糖苷酶基因pwtsA, 将其克隆到表达载体pET30a, 转化E. coli BL21(DE3)。工程菌在IPTG诱导下高效表达可溶性的重组蛋白PWTSA, 分子量为57 kD, 与预期大小一致。PWTSA能够水解ONPG产生o-硝基酚, 酶活力为13.6 U/mg, 确证了重组蛋白为b-半乳糖苷酶。PWTSA的最适反应温度在85°C ~95°C之间, 最适pH值为6.5, 对90°C左右的高温有很好的耐受力。在标准反应条件下, 酶作用于底物ONPG的米氏常数Km为0.83 mmol/L。 %K b-半乳糖苷酶 %K 宏基因组 %K pwtsA %K 基因表达 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=0EF14281FF7BE9BDEAB8E153672B7AAA&yid=67289AFF6305E306&vid=6209D9E8050195F5&iid=708DD6B15D2464E8&sid=0D56350A4FA1FCC9&eid=721F8E311AAA0176&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=0