%0 Journal Article %T 2,5-DKG还原酶Ⅱ基因的克隆和在大肠杆菌中的表达* %A 李越 %A 陈策实 %A 尹光琳 %J 微生物学通报 %D 1999 %I %X 参照文献上的2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(简称2,5-DKG)还原酶II基因序列,合成两个引物序列并在两端加上EcoRI和BamHI两个酶切位点,抽提棒状杆菌SCB3058菌株的染色体为模板进行PCR反应,克隆得到2,5-DKG还原酶II基因,酶切验证与预期的结果相符合。将此片段克隆到pGEM-T载体上保存.将2,5-DKG还原酶II基因用EcoRI和BamHI内切酶切下,连接到pBV220载体上,构建成表达载体。42℃诱导不能得到稳定的蛋白表达条带和酶活力,测序发现基因的3’末端的原PCR引物外少合了一 %K 2 %K 5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶Ⅱ基因 %K PCR %K 克隆 %K 表达载体 %K SD序列 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=78024727B5F4EF6AA9CA8E605B5FC464&aid=FA0AC6892C1B00299C60B03B1976F3D2&yid=B914830F5B1D1078&vid=96C778EE049EE47D&iid=E158A972A605785F&journal_id=0253-2654&journal_name=微生物学通报&referenced_num=0&reference_num=0