%0 Journal Article
%T Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) for Detection of Human Astrovirus and Its Application in Reclaimed Water
环介导等温扩增技术(LAMP)检测人星状病毒方法的建立及其在再生水检测中的应用
%A Yang Li
%A He Xiaoqing
%A Wei Yu-mei
%A Zhu Yi
%A Cheng Li
%A Wang Zijian
%A Huang Wen
%A
杨丽
%A 何晓青
%A 韦玉梅
%A 朱轶
%A 程莉
%A 王子健
%A 黄文
%J 生态毒理学报
%D 2011
%I
%X 为快速高效地检测人星状病毒,建立了一种新的试验方法——环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification technology,LAMP),并对人星状病毒LAMP反应条件进行了优化.结果表明,镁离子终浓度为4 mmol·L-1、甜菜碱终浓度为1mol.L-1的25μL体系下65℃反应90 min为其最佳反应条件.对扩增终产物进一步进行酶切分析得到的条带大小与预期的结果(84和135 bp)吻合,以人星状病毒、轮状病毒及诺如病毒为模板进行特异性测试亦没有发生交叉反应.将人星状病毒质粒等倍稀释后分别用LAMP及聚合酶链式反应(PCR)检测其灵敏度,结果表明,LAMP与PCR的灵敏度分别达到5.04 copies·μL-1和50.4 copies·μL-1.用改良的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)及逆转录PCR(RT-PCR)检测12个再生水水样,其中人星状病毒检出率为分别为41.7% (5/12)和33.3% (4/12).以上结果证明,LAMP是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的检测手段,在人星状病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力.
%K human astrovirus
%K LAMP
%K HNB
%K magnesium pyrophosphate
%K reclaimed water
人星状病毒
%K 环介导等温扩增技术(LAMP)
%K HNB
%K 焦磷酸镁
%K 再生水
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=3FF3ABA7486768130C3FF830376F43B398E0C97F0FF2DD53&cid=BEC1F4700DD66C14D137590A0896A0AD&jid=B98D390DF92C35E6DD1987675E4EE86E&aid=672086C4D99B6BCFE8096486725F239B&yid=9377ED8094509821&vid=B31275AF3241DB2D&iid=B31275AF3241DB2D&sid=1D5555D0B4345CA8&eid=6EEC242D0D8BE428&journal_id=1673-5897&journal_name=生态毒理学报&referenced_num=0&reference_num=22