%0 Journal Article %T Purification and characterization of extracellular protease of Bacillus licheniformis
地衣芽孢杆菌胞外蛋白酶的纯化及特性分析 %A CAO Yu-Cheng %A LI Zhuo-Jia %A WU Zao-He %A FENG Juan %A
曹煜成 %A 李卓佳 %A 吴灶和 %A 冯娟 %J 水生生物学报 %D 2006 %I %X 研究不同条件对地衣芽孢杆菌De株产生胞外蛋白酶的量及其酶活性的影响,结果表明在pH为7.4—8.2范围内,温度为30℃时,培养8—12h的菌株所分泌胞外产物中的蛋白酶活性最高。实验先以半透膜法收集芽孢杆菌的胞外产物,然后再经过硫酸铵沉淀过夜S、ephadex G-100凝胶层析和DEAE-Cellulose离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳等四个步骤的分离纯化后,可以得到含有3种主要蛋白质(BLP1、BLP2、BLP3)成分的胞外蛋白酶,其分子量分别为66.2KD、31.0KD及约20.1KD,所得纯化蛋白酶的蛋白浓度为0.773μg/mL,蛋白回收率为11.66%。实验还发现,纯化的胞外蛋白酶在100℃下作用30min,仍可保持其活力,可见具有相当的热稳定性,而其酶活最佳的pH和温度条件分别为7.8和45—65℃。酶活抑制实验显示EDTA、铜、钴、镁离子等均可成为其酶活抑制因子;而丝氨酸蛋白酶抑制剂甲基磺酰氟(PMSF)、铁、锰、钡、钙离子等对酶活性没有明显影响;锌则会令之酶活性其部分丧失。 %K Bacillus licheniformis %K Extracellular proteases %K Purification %K Characterization
地衣芽孢杆菌 %K 胞外产物 %K 纯化 %K 特性分析 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=BF78BC6CAFF37C47&yid=37904DC365DD7266&vid=340AC2BF8E7AB4FD&iid=38B194292C032A66&sid=30897FA31CA3354D&eid=DC330B09A33F1455&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=3&reference_num=17