%0 Journal Article
%T Cloning and prokaryotic expression of hsp70 cDNA from planarian Dugesia japonica<br>日本三角涡虫hsp70 cDNA克隆及原核表达
%A 马克学
%A 陈广文
%A 娄 昊
%A 费利娜
%J 水生生物学报
%D 2010
%I 
%X 热休克蛋白70是热休克蛋白家族中的重要成员, 它在保护生物体免受各种胁迫中发挥重要作用。由于其惊人的再生能力, 淡水涡虫作为研究再生和发育的模式动物受到研究者关注。但是, 有关涡虫抗逆性的分子机制却少有报道。研究采用 RACE (Rapid amplification of cDNA end) 技术首次从日本三角涡虫中克隆出hsp70 (Djhsp70)全长cDNA序列。Djhsp70 cDNA全长2066 bp, 含有1947 bp的开放阅读框, 编码648个氨基酸, 分子量71.18 kD, GenBank登录号EU380241。DjHSP70的氨基酸含有真核生物HSP70家族蛋白的三个标签序列(9–16 位的IDLGTTYS、199—206位的 DLGGGTFD、334–339位的IVLVGG)和末端高度保守序列EEVD。经BLAST检索分析, Djhsp70的核苷酸序列和推定的氨基酸序列与目前已知HSP70家族成员高度同源。有趣的是, HSP70亲缘关系分析表明: 涡虫更靠近脊椎动物, 而与无脊椎动物果蝇和线虫相距较远。为了制备抗体研究DjHSP70的组织学定位, 实验还成功构建了DjHSP70表达载体, 在IPTG诱导下表达出约76 kD的融合蛋白。Djhsp70 cDNA的克隆与表达载体的构建为下一步工作奠定了基础。
%K 日本三角涡虫
%K HSP70
%K 克隆
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=C063E74B2CC938CC1471C1D9CCEE1143&yid=140ECF96957D60B2&vid=339D79302DF62549&iid=0B39A22176CE99FB&sid=E3094127AA4ABC1A&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=0&reference_num=19