%0 Journal Article
%T Development and application of a mammlian one hybrid-based high-throughput screening model for Era modulator<br>基于哺乳动物单杂交技术ERα调节剂高通量筛选模型的建立及应用
%A Qian Zhang
%A Xiaoxi Shui
%A Yuling Fan
%A Weili Hao
%A Zhihui Zheng
%A Xinhua Lu
%A Baohua Zhao
%A Hua Zhang
%A Jiangong He
%A <br>张倩
%A 水小溪
%A 范玉玲
%A 郝伟丽
%A 郑智慧
%A 路新华
%A 赵宝华
%A 张华
%A 贺建功
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 雌激素受体α(Estrogen receptor α,ERα)是一种类固醇核受体,在机体的多种生理功能中起关键作用。为了筛选新的ERα调节剂,本研究建立一个基于哺乳动物单杂交的报告基因技术的高通量ERα调节剂筛选模型。利用RT-PCR技术从脂肪组织总RNA中扩增ERα配体结合区(Ligand binding domain,ERαLBD)基因序列,并插入含GAL4DNA结合域的pBIND-GAL4表达质粒构建pBIND-GAL4-ERα(LBD)的嵌合表达质粒。该质粒与本室已构建好的含GAL4响应元件和荧光素酶的报告质粒pGL3-GAL4共转染,通过测定荧光素酶的活性评价ER调节剂的转录调剂的活性。经过多种条件优化,激动剂阳性药对照雌二醇可以剂量依赖地诱导荧光素酶的表达,最大上调倍增数可达28.1倍,EC50为0.17μmol/L。拮抗剂阳性对照它莫昔芬可以有效地拮抗雌二醇的活性,最大下调倍数为6.3倍,EC50为0.1μmol/L。该筛选模型可微量化于384孔板,且Z'因子均大于0.5。利用该模型从2000多个微生物和植物来源的天然产物以及合成化合物中筛选得到4个ERα激动剂。该模型灵敏、稳定,可以快速进行多...
%K ERα
%K 激动剂
%K 拮抗剂
%K 共转染
%K 高通量筛选
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=79C69747094C4AF65645B7AECF878904&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=DF92D298D3FF1E6E&sid=61EDB4BBA42E40FF&eid=6B48C3DA6EA0194C&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=25