%0 Journal Article
%T Construction of a dual-promoter expression plasmid delivered by Salmonella choleraesuis C500<br>猪霍乱沙门氏菌递送的双启动子表达载体的构建
%A Dishi Chen
%A Wanzhu Guo
%A Zhiwen Xu
%A Yang Chen
%A Wen Li
%A Yin Wang
%A Ling Zhu
%A Xiaoyu Wang
%A <br>陈弟诗
%A 郭万柱
%A 徐志文
%A 陈杨
%A 李雯
%A 王印
%A 朱玲
%A 王小玉
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 猪霍乱沙门氏菌C500株不仅可以作为预防猪沙门氏菌病的活疫苗,还可作为运送其他DNA疫苗的优良载体,并通过粘膜免疫诱导产生针对特定抗原的各种免疫应答。为增强其携带的DNA疫苗的免疫效力,本研究以真核表达载体pEGFP-C1为基础,将其真核启动子CMVie与原核启动子Ptrc串联,并在其多克隆位点MCS下游引入rrnbT1T2转录终止序列,构建了真、原核双启动子表达载体pEGFPPtrcR。用1×TSS法将其转化C500,得到工程菌C500/pEGFPPtrcR,通过SDS-PAGE和Westernblotting鉴定了报告基因EGFP的原核表达,该菌在荧光显微镜下能发出强烈绿色荧光,被证明在体外至少能稳定遗传20代;采用脂质体介导法将pEGFPPtrcR转染Vero细胞,EGFP在胞核和胞浆内表达,24h后观察可到明显绿色荧光。结果表明,双启动子表达载体pEGFPPtrcR构建成功,预示其携带的外源基因既可在C500中表达,又可在体细胞中表达,为研制以C500为载体的新型DNA疫苗的发展开辟了一个新的途径。
%K Salmonella choleraesuis C500
%K promoter
%K vector
%K DNA vaccine<br>猪霍乱沙门氏菌
%K 启动子
%K 绿色荧光蛋白表达载体C1
%K DNA疫苗
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=E4C1E7C7D43BCA4B15346A485B73CAA2&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=38B194292C032A66&sid=4B168891B5E5FB30&eid=15251AE9C02726D3&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=19