%0 Journal Article
%T 基于核酶技术的人线粒体色氨酸tRNA的高效转录及其活性鉴定
%A 巩菊芳
%A 曹诣斌
%A 陈祥龙
%A 齐育平
%A 杨小强
%A 金晓玲
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 利用T7RNA聚合酶(T7 RNA polymerase,T7 RNAP)的体外转录方法因其简便、高效而在RNA制备中得到广泛应用,但该法由于T7RNAP的启动子跨越转录起始位点而会导致转录产物多出附加序列;如果去掉T7启动子的转录起始位点,则会严重降低T7RNAP的转录活性。本实验很好地消除了以上弊端,将T7RNAP的高效转录系统与核酶高度专一的自剪切技术相结合,成功构建了一种不影响转录效率的体外转录方法,而且转录后核酶能够在设计的特定位点进行自剪切并释放出目的RNA,得到了活性达113.6pmol/μg的人线粒体色氨酸tRNA(HmtRNATrp(UCA))。该方法转录效率高、重复性好,适合RNA的大量精确制备。
%K 体外转录
%K 核酶
%K 人线粒体色氨酸tRNA
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=86FB9B9C1A742C07E7F36E4A025215EB&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=708DD6B15D2464E8&sid=48603EE1050A0BB7&eid=0F13B34BCC0D8726&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=17