%0 Journal Article
%T 鸽β-防御素5基因克隆及其抗菌活性
%A 辛胜男
%A 张可心
%A 张名岳
%A 韩宗玺
%A 邵昱昊
%A 刘晓丽
%A 刘胜旺
%A 马得莹
%J 生物工程学报
%D 2012
%I 
%X 从鸽的骨髓和肝组织中扩增到2个禽β-防御素 (AvBD) 基因，在大肠杆菌中高效表达，检测其重组蛋白的抗菌活性。应用RT-PCR方法从鸽的骨髓和肝脏组织中扩增AvBD5基因，根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-5的氨基酸序列构建系统进化树，将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达，对该重组蛋白进行纯化，测定体外抗菌活性与理化特性。测序得到这2个基因的cDNA大小均为201 bp，编码66个氨基酸残基，内含6个位置保守的半胱氨酸残基。经遗传进化分析发现，该基因推导的两组氨基酸序列与鸭AvBD5的同源性最高，分别为87.9％和78.8％，这两组氨基酸序列的同源性为83.3％。因此，将其分别命名为鸽AvBD5α (骨髓) 和鸽AvBD5β (肝脏)。进一步将这两个基因分别亚克隆到大肠杆菌pGEX-6p-1载体中进行原核表达。两个重组融合蛋白经纯化后，通过菌落计数法测定其体外抗菌活性，盐离子浓度对其抗菌活性的影响，及其融合蛋白的溶血活性。结果表明，重组鸽AvBD 5α、AvBD 5β融合蛋白的分子量约为32 kDa。具有明显的抗菌活性，对12种细菌均有不同程度的抑制作用，高盐浓度对其抗菌活性显著影响。此外，这两个重组蛋白对红细胞无显著溶血活性。
%K 鸽β-防御素5，重组蛋白，抗菌活性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=324F8504B270985647E443AA8391D577&yid=99E9153A83D4CB11&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=708DD6B15D2464E8&sid=5A700C739C4FF128&eid=3BA4B6BD78D34019&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0