%0 Journal Article %T 小眼虫藻Δ8-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 %A 黎明 %A 欧秀元 %A 杨向东 %A 郭东全 %A 钱雪艳 %A 邢来君 %A 魏东盛 %A 李明春 %J 生物工程学报 %D 2010 %I %X Δ8途径是合成多不饱和脂肪酸的替代途径,Δ8-脂肪酸脱氢酶是该途径的关键酶之一。根据已报道的Δ8-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从小眼虫藻基因组DNA和cDNA中扩增得到该基因片段,序列分析表明:结构基因长1 266 bp,编码421个氨基酸;该基因没有内含子,比已经报道的Δ8-脂肪酸脱氢酶基因长6 bp,并且N末端序列也有所不同。利用酿酒酵母的载体pYES2.0构建Δ8-脂肪酸脱氢酶表达载体pYEFD,并转化到营养缺陷型酿酒酵母菌株INVSc1中,在选择培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YD8。YD8在合适的培养条件下,添加外源底物二十碳二烯酸和二十碳三烯酸并诱导基因表达。脂肪酸甲酯气相色谱分析表明小眼虫藻Δ8-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中获得了高效表达,将二十碳二烯酸和二十碳三烯酸分别转化成二高-γ-亚麻酸和二十碳四烯酸,其底物转化率分别达到了31.2%和46.3%。 %K Δ8-脂肪酸脱氢酶,小眼虫藻,多不饱和脂肪酸 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=CED3A528F5C15A898277D03B94DC67AF&yid=140ECF96957D60B2&vid=96C778EE049EE47D&iid=708DD6B15D2464E8&sid=3DEC1A337B83DA73&eid=D56713C22DA9FDE8&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0