%0 Journal Article
%T Construction of Recombinant Yellow Fever Virus 17D Containing 2A Fragment as a Vaccine Vector<br>含2A片段的重组黄热病毒17D疫苗表达载体的构建
%A Xiaowu Pang
%A FU Wen-Chuan
%A GUO Yin-Han
%A ZHANG Li-Shu
%A XIE Tian-Pei
%A Xinbin Gu
%A <br>Xiaowu Pang
%A 付文川
%A 郭银汉
%A 张立树
%A 谢天培
%A Xinbin Gu
%J 生物工程学报
%D 2006
%I 
%X 黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D(YF-17D)活疫苗,是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一,适于发展为疫苗载体。用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段:5′cDNA(A)、3′cDNA(B)和中间cDNA(C),同时引入SP6增强子序列、酶切位点和重复序列。顺序将A和B同E.coli-yeast穿梭质粒pRS424连接,再与C共转染酵母菌,利用缺少色氨酸和尿嘧啶的选择性固体培养基筛选出含YF-17D全长基因组的cDNA质粒。以该质粒为模板,经过DNA重组和酵母同源重组,获得含有口蹄疫病毒蛋白水解酶2A片段的重组YF-17D表达载体。将该表达载体体外转录后,电击转染BHK-21细胞。间接免疫荧光检测结果表明,RNA转录体在BHK-21细胞中进行了稳定的表达;滴度测定与形态学观察结果表明,重组病毒在细胞中的生长曲线等特征同母本YF-17D十分相似。结果提示,利用酵母菌同源重组在2A部位引入异种抗原基因,重组YF-17D表达载体pRS-YF-2A1具有成为高效活疫苗表达载体的潜力。
%K yellow fever virus 17D
%K expression vector
%K 2A fragment
%K full-length cDNA
%K homologous recombination<br>黄热病毒17D
%K 表达载体
%K 2A片段
%K 全长cDNA
%K 同源重组
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=F936B13AB7761767&yid=37904DC365DD7266&vid=BC12EA701C895178&iid=38B194292C032A66&sid=4A2356A1257A12EB&eid=E3C3E274D87A8C16&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=1&reference_num=23