%0 Journal Article
%T 从水稻Ac/Ds插入突变体扩增Ds侧翼序列的最适TAIL-PCR引物(英文)
%A 孙丙耀
%A PIAO Hai-Long
%A PARK Sung-Han
%A HAN Chang-Deok
%J 生物工程学报
%D 2004
%I 
%X 温度非对称交互PCR(TAIL PCR)技术已广泛应用于从多种生物体系克隆侧翼于已知序列的DNA片段的分子操作中 ,并极大地促进了反向遗传学研究。但是 ,可能由于不同物种间基因组大小和序列存在显著差异 ,在采用该技术进行转座元件Ds水稻插入突变体鉴定过程中 ,常因TAIL PCR反应的稳定性差而影响突变体筛选效率。有鉴于此 ,根据Ds核苷酸序列设计了分别对应或互补于Ds插入元件两端长度不同的 12个特异引物组成 32个组合 ,在大量预试验基础上与 6个不同简并性 (32～256 )的随机简并引物分别组合进行TAIL PCR反应 ,较系统地研究了引物特性对以水稻基因组DNA为模板的TAIL PCR反应效率的影响。结果发现 ,第一反应采用长序列特异引物(36～ 4 0mer)可显著提高扩增特异性 ,随机简并引物的简并度对反应的影响显著。还选择出两个适于从水稻Ds插入突变体基因组高效扩增出Ds插入侧翼片段的最优特异引物组合和最适简并引物。应用本研究结果可显著地提高TAIL PCR技术筛选水稻插入突变体的效率
%K 随机简并（AD）引物
%K Ds-特异引物
%K Ds侧翼序列
%K 水稻
%K 温度非对称交互PCR
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=1A3F9655DCAAB0BD108122FFA901884E&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=A04140E723CB732E&iid=B31275AF3241DB2D&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0