%0 Journal Article
%T Construction of HBD-3 gene mammary-specific expression vector and eukaryotic expression<br>HBD-3基因的乳腺特异性表达载体的构建及真核表达
%A Wei Peng
%A Zhigang Lan
%A Jingjing M
%A Baolei Wang
%A Yong Zhang
%A <br>彭巍
%A 兰志刚
%A 马晶晶
%A 王保垒
%A 张涌
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 为了制备高效表达人β-防御素-3基因的转基因奶牛提供可靠的核移植供体细胞,本试验采用RT-PCR从人胎盘组织获得人β-防御素3cDNA,通过双酶切法将目的基因片段hBD插入到质粒pBCP之间,最后再通过双酶切法将目的片段BCD插入到真核表达载体pEGFP-C1中,最终构建乳腺特异性表达载体pEBCD。脂质体介导法转染奶牛胎儿成纤维细胞G418,抗性筛选3~4周后,经PCR、RT-PCR扩增检测和报告基因EGFP表达检测,得到稳定整合外源基因的转基因供体细胞;同时检测稳定转染的奶牛乳腺上皮细胞系的上清液,检测到重组人β-防御素-3蛋白可以在奶牛乳腺上皮细胞组织特异性表达。
%K 人β-防御素
%K 3
%K 奶牛β-酪蛋白
%K EGFP
%K 报告基因
%K 供体细胞
%K 核移植
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=23EA43E55DE38172FDDADDB16D6D40EF&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=DF92D298D3FF1E6E&sid=20154CF366EC08B1&eid=3A9B6DFDAB34D091&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=2&reference_num=18