%0 Journal Article
%T Rescue of porcine circovirus type 2 from cloned DNA<br>猪圆环病毒2型双拷贝感染性DNA的构建及体外拯救
%A Jun Li
%A Jianli Shi
%A Zhou Yu
%A Shaojian Xu
%A Peng Ding
%A Kaihui Cheng
%A Jinbao Wang
%A <br>李俊
%A 时建立
%A 于周
%A 徐绍建
%A 丁鹏
%A 程凯慧
%A 王金宝
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将2个PCV2SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外课题组成功构建含单个PCV2全基因组的pSK-PCV2和自身环化质粒ds-PCV2。将所得3种质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经10次连续传代后,间接免疫荧光试验检测显示三者均在细胞核中聚集大量的病毒抗原;经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录;透射电镜下可观察到直径约为17～20nm的典型PCV2病毒粒子;经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100%。拯救出的PCV2与亲本病毒具有相同的病毒学及分子生物学特性。本研究应用PCR诱变技术成功构建PCV2双拷贝感染性克隆,并经体外拯救证实其具有感染性,为进行PCV2分子特性及致病机理研究打下了基础。
%K porcine circovirus type 2
%K single copy
%K double copy
%K cyclization
%K infectious clones
%K virus rescue<br>猪圆环病毒2型
%K 单拷贝
%K 双拷贝
%K 自身环化
%K 感染性克隆
%K 体外拯救
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=6BD99413BAE815257AF2FEE6F16D7DF8&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=708DD6B15D2464E8&sid=F4403DA1034A7215&eid=592C06DEDA153E98&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=18